当前位置: 首页 » 资料 » 健康论文 » HEP-Flury株病毒辅助质粒包装CTN株病毒基因组拯救狂犬病病毒

HEP-Flury株病毒辅助质粒包装CTN株病毒基因组拯救狂犬病病毒

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的以CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒(pCTN-GFP)和HEP-Flury株病毒N、P、L辅助质粒共转染拯救具有活性的CTN株重组狂犬病病毒(CTN-GFP)。方法将CTN株狂犬病病毒
  • 【题 名】HEP-Flury株病毒辅助质粒包装CTN株病毒基因组拯救狂犬病病毒
  • 【作 者】黄莹 唐青 扈荣良
  • 【机 构】吉林大学农业系 长春130062 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室 军事医学科学院军事兽医研究所
  • 【刊 名】《中华流行病学杂志》2009年 第5期 493-496页 共4页
  • 【关键词】狂犬病病毒 基因组 结构蛋白 病毒拯救
  • 【文 摘】目的以CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒(pCTN-GFP)和HEP-Flury株病毒N、P、L辅助质粒共转染拯救具有活性的CTN株重组狂犬病病毒(CTN-GFP)。方法将CTN株狂犬病病毒全长基因组分4段进行扩增,体外连接扩增片段并克隆人表达载体中,构建CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒,基因组ψ基因被标识基因GFP取代,通过与HEP-Flury株病毒N、P、L3个辅助质粒共转染BHK-21细胞,拯救能够稳定表达GFP的重组病毒CTN-GFP。结果成功扩增全长基因组的4个基因片段,并将其克隆入表达载体,构建了CTN株狂犬病病毒全长基因组cDNA重组质粒pCTN-GFP,经酶切鉴定和序列测定证明pCTN-GFP为正确克隆,可直接用于病毒拯救。将pCTN-GFP与HEP-Flury株病毒辅助质粒共转染BHK-21细胞4d后,成功拯救出CTN株重组狂犬病病毒,重组病毒能够表达标识基因GFP,荧光显微镜下可直接观察到标识基因GFP的表达,设计跨GFP和L基因的特性引物对重组病毒进行RT-PCR检测,结果证明此病毒是从克隆的质粒中拯救的重组病毒。结论HEP-Flury株病毒的结构蛋白能够包装并转录CTN株病毒的基因组RNA。
 
本文导航:
  • (1) 狂犬病病毒,基因组,结构蛋白,病毒拯救
  • 下一篇:鳖甲
  • 上一篇:暂无
 
[ 资料搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 

 
推荐图文
推荐资料
热门关注