当前位置: 首页 » 资料 » 健康论文 » 多重荧光定量PCR甄别霍乱弧菌方法的建立

多重荧光定量PCR甄别霍乱弧菌方法的建立

放大字体  缩小字体 更新日期:2016-02-09  浏览次数:0
摘 要:目的 利用多重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异甄别霍乱弧菌的定量方法.方法 分别根据霍乱弧菌霍乱毒素A亚单位基因(ctxA)和糖基转移酶基因(LPSgt)作为检测的靶基因,设计引物和Taq
  • 【题 名】多重荧光定量PCR甄别霍乱弧菌方法的建立
  • 【作 者】张政 金大智 朱水荣 叶菊莲 罗芸
  • 【机 构】浙江省疾病预防控制中心 杭州310051
  • 【刊 名】《中华流行病学杂志》2010年 第9期 1026-1029页 共4页
  • 【关键词】霍乱弧菌 多重实时荧光定量PCR
  • 【文 摘】目的 利用多重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异甄别霍乱弧菌的定量方法.方法 分别根据霍乱弧菌霍乱毒素A亚单位基因(ctxA)和糖基转移酶基因(LPSgt)作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan-MGB探针,探针的5'端分别用FAM和VIC进行荧光标记,3'端标记MGB.优化PCR扩增体系,对多重实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性评价,同时进行一定数量临床样本考核鉴定,与常规方法进行比较.结果 该方法可准确、特异地鉴定霍乱弧菌,同时能够甄别O139群霍乱弧菌.全部的霍乱弧菌用ctxA基因对应引物和探针检测均为阳性,其中只有O139群霍乱弧菌出现LPSgt基因阳性,其他菌株均无阳性结果.检测的灵敏度为2×102 cfu/ml.同时对收集的45例临床样本进行鉴定,结果显示10例为霍乱弧菌,其中O139群有4例,其余均为阴性结果,与常规鉴定方法一致.结论 研究建立的多重荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可有效鉴定产毒霍乱弧菌及甄别O139群霍乱弧菌,可用于霍乱监测和防制工作中的实验室诊断.
 
本文导航:
  • (1) 霍乱弧菌,多重实时荧光定量PCR
  • 下一篇:鳖甲
  • 上一篇:暂无
 
[ 资料搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告诉好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 关闭窗口 ]

 

 
推荐图文
推荐资料
热门关注